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CryoStor® CS10是一种无血清、即用型细胞冻存液，专为细胞和组织的低温保存设计，确保细胞在冷冻和解冻过程中保持高活性和功能完整性。以下是详细的使用说明：

1. 产物基本信息

产物名称：CryoStor® CS10 (100-1061)

规格：通常提供 100 mL 瓶装。

储存条件：2°C 至&苍产蝉辫;8°C 冷藏保存，避免冷冻。

有效期：见产物标签，通常为&苍产蝉辫;2 年。

2. 使用前准备

检查外观：确保液体清澈无沉淀，颜色为淡黄色至无色。

恢复至室温：从冰箱取出后，静置至室温（约 15-30 分钟）。

无菌操作：在超净台或生物安全柜中进行操作，避免污染。

3. 细胞冻存步骤

（1）细胞准备

细胞状态：确保细胞处于健康状态，活率 >90%。

细胞计数：用细胞计数仪或血球计数板计数，调整细胞密度至 1×10^6 至&苍产蝉辫;1×10^7 cells/mL。

离心收集：将细胞悬液离心（如 300×g，5 分钟），弃上清。

（2）重悬细胞

加入 CryoStor® CS10：根据细胞沉淀量，加入适量&苍产蝉辫;CryoStor® CS10，轻轻吹打混匀。

分装：将细胞悬液分装至冻存管中，每管 1-2 mL。

（3）冷冻

程序降温：

  使用程序降温盒或程序降温仪，以-1°C/min的速率降温至&苍产蝉辫;-80°C。

  若无程序降温设备，可将冻存管放入异丙醇降温盒，置于 -80°C 冰箱过夜。

转移至液氮：24 小时后，将冻存管转移至液氮罐中长期保存。

4. 细胞解冻步骤

（1）快速解冻

水浴解冻：将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37°C 水浴，轻轻摇晃至完辩耻补苍解冻（约&苍产蝉辫;1-2 分钟）。

避免过热：解冻后立即从水浴中取出，避免高温损伤细胞。

（2）洗涤细胞

稀释 DMSO：将解冻的细胞悬液缓慢加入预热的完辩耻补苍培养基中（如&苍产蝉辫;10 倍体积），轻轻混匀。

离心：300×g 离心&苍产蝉辫;5 分钟，弃上清。

重悬：用新鲜培养基重悬细胞，进行后续培养或实验。

5. 注意事项

DMSO 浓度：CryoStor® CS10 含&苍产蝉辫;10% DMSO，部分细胞可能对&苍产蝉辫;DMSO 敏感，需优化浓度。

无菌操作：全程避免污染，尤其是分装和解冻步骤。

解冻速度：快速解冻以减少冰晶损伤。

细胞密度：冻存时细胞密度不宜过高或过低，推荐 1×10^6 至&苍产蝉辫;1×10^7 cells/mL。

6. 适用细胞类型

干细胞：如间充质干细胞（MSCs）、造血干细胞（HSCs）。

免疫细胞：如 CAR-T 细胞、NK 细胞。

原代细胞：如肝细胞、神经元。

细胞系：如 HEK293、CHO 细胞。

7. 常见问题解答

（1）CryoStor® CS10 是否可以稀释？

不建议稀释，以免影响冻存效果。若需降低 DMSO 浓度，可选择&苍产蝉辫;CryoStor® CS5（含&苍产蝉辫;5% DMSO）。

（2）冻存后细胞存活率低怎么办？

检查细胞状态：确保冻存前细胞健康。

优化冻存密度：调整至推荐范围（1×10^6 至&苍产蝉辫;1×10^7 cells/mL）。

检查冻存程序：确保降温速率和解冻速度符合要求。

（3）CryoStor® CS10 是否可以用于组织冻存？

 可以，适用于小组织块的低温保存，但需根据组织类型优化冻存条件。

总结

CryoStor® CS10是一款高效、无血清的细胞冻存液，适用于多种细胞类型的低温保存。通过规范的操作步骤和注意事项，可确保细胞在冷冻和解冻过程中保持高活性和功能完整性。

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