产物概述
E.coli HCP ELISA检测试剂盒(2G)是一款专为科研和工业领域设计的检测工具,用于精准定量生物制品(如疫苗、重组蛋白药物)中间品、半成品及成品中残留的大肠杆菌宿主细胞蛋白(HCP)。该试剂盒采用双抗体夹心法,结合高灵敏度酶标技术,可检测低至0.3 ng/mL的蛋白残留,为生物制药质量控制提供可靠支持。
核心优势
- 高灵敏度与宽检测范围:检测限0.3 ng/mL,定量限1 ng/mL,覆盖1.5625-100 ng/mL线性范围。
- 高精度与稳定性:精密度CV%≤10%,回收率偏差RE%≤&辫濒耻蝉尘苍;15%,确保实验数据可重复。
- 广泛适用性:兼容DH5α、BL21等常用工程菌株,适用于多种生物制品基质。
- 即用型设计:预包被酶标板、即用标准品及优化试剂配方,简化实验流程。
应用场景
- 生物制药研发:监测重组蛋白、抗体药物生产过程中E.coli宿主蛋白残留。
- 质量控制:评估药品中间品、成品的纯度与安全性。
- 科研实验:用于基因工程菌相关研究中的HCP定量分析。
检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术:
1. 捕获抗体包被:预包被E.coli HCP特异性抗体的酶标板捕获样本中的目标蛋白。
2. 酶标抗体结合:HRP标记的二抗与HCP结合,形成“抗体-抗原-酶标抗体"复合物。
3. 显色定量:TMB底物显色后,通过吸光度值(OD450/650nm)计算HCP浓度,结合标准曲线实现精准定量。
操作流程简述
1. 样本处理:用样本稀释液稀释待测样品及标准品。
2. 加样与孵育:将标准品、样本加入酶标板,37℃孵育1小时。
3. 洗涤与标记:洗去未结合物质,加入稀释后的酶标抗体二次孵育。
4. 显色与终止:TMB显色液反应后,加入终止液终止反应。
5. 数据分析:读取OD值,通过四参数方程拟合标准曲线,计算样本浓度。
储存与有效期
- 未开封试剂盒:-20℃保存,有效期12个月。
- 开封后:显色液需2-8℃避光保存,酶标板短期存放于2-8℃。
常见问题解答(Q&A)
Q:阴性对照出现阳性信号怎么办?
A:可能是交叉污染或洗涤不彻颈底,建议更换试剂、规范操作并充分洗涤。
Q:标准曲线显色弱或无信号?
A:检查试剂活性、稀释步骤是否正确,确保酶标抗体和底物未失效。
Q:复孔数据差异大如何解决?
A:优化移液操作,确保枪头气密性,避免样本基质干扰。
对于我们
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