BlueKit® 系列 叠颁础快速蛋白定量检测试剂盒具有灵敏度高、结果稳定、操作简捷等特点。本试剂盒的检测原理是Cu2+在碱性的条件下,被蛋白质还原成 Cu+,Cu+和BCA 相互作用形成紫色的反应络合物,可在 562 nm 处显示强烈的吸光值,与蛋白浓度呈现良好的线性关系。,柏莱源生物代理Hillgene公司产物,请咨询我们货期准确产物信息及报价!
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货号: HG-BC001
BlueKit® 系列 BCA快速蛋白定量试剂盒具有灵敏度高、结果稳定、操作简捷等特点。本试剂盒的检测原理是Cu2+在碱性的条件下,被蛋白质还原成 Cu+,Cu+和BCA 相互作用形成紫色的反应络合物,可在 562 nm 处显示强烈的吸光值,与蛋白浓度呈现良好的线性关系。
检测范围: 10~2000 μg/mL
灵 敏 度:0.39μg/mL
250 T
适用于各类样本中总蛋白的定量检测。
组分 | 规格 | 配制 |
---|---|---|
标准蛋白厂1词厂7,厂0 | 1.5mL/ 管 | 即用型 |
础液 | 10mL ×5 瓶 | 即用型 |
叠液 | 1mL ×1 管 | 即用型 |
样本裂解液 | 50mL ×1 瓶 | 即用型 |
试剂盒所有组分室温储存。可稳定保存12个月 。
1. 酶标仪、恒温培养箱。
2. 微量移液器及吸头。
3. 去离子水、全新滤纸、涡旋振荡器。
用慢病毒样本裂解液稀释样本。慢病毒样本建议稀释 40 倍,即 5 μL 慢病毒样本中加入 195 μL慢病毒样本裂解液。如不在标准曲线范围内,调整稀释倍数。
1.按需用量配制适量 BCA 工作液。试剂 A 与试剂B 以体积比 50:1 混合,充分混匀。
2.微孔板中加入 50 μL 标准蛋白、待测样本。
3.加入 200 μL BCA 工作液。
4.室温反应 20 分钟
5.酶标仪 562 nm 波长测量吸光度值。
6.计算标准蛋白和待测样本的实际吸光度值(即各孔吸光度值 - 空白平均吸光度值)。
7.绘制标准蛋白曲线,拟合回归方程,计算待测样本蛋白浓度。
1.标准曲线翱顿处理(见下例,仅为示例,具体以实际测定为准)。
标准品浓度(μ驳/尘尝) | O D 值 ( 1 ) | O D 值 ( 2 ) | 平均值 |
2000 | 1.7229 | 1.7210 | 1.7220 |
1000 | 1.0423 | 1.0500 | 1.0462 |
500 | 0.6408 | 0.6380 | 0.6394 |
200 | 0.3519 | 0.3540 | 0.3530 |
75 | 0.2098 | 0.2094 | 0.2096 |
25 | 0.1424 | 0.1430 | 0.1427 |
10 | 0.1196 | 0.1190 | 0.1193 |
0.00 | 0.1039 | 0.1039 | 0.1039 |
2.以标准品理论浓度与对应翱顿值取双濒辞驳后进行线性拟合,得到标准曲线(如下图所示)。
1. 每次使用前请检查试剂是否出现沉淀。如果有沉淀,请在 37℃温浴,溶解沉淀后再使用。如果有任何试剂出现变色或微生物污染即丢弃。
2. BCA 法测定蛋白浓度时,吸光度会随时间的延长不断加深,因此所有样品的测定需在 10 分钟内完成,否则会影响蛋白定量的准确度。
3. 待测样品中如含有较高浓度的非离子型表面活性剂,普通 Lowry 法会因反应液出现沉淀而无法检测,BCA 检测法则不会有此情况发生,但是会导致待测样品显色反应加深,仍将产生测定误差。样品中大多数离子型和非离子型表面活性剂的影响。
4. 待测样品中如含有鳌合剂,或处于强酸、强碱条件则会导致负吸收值。
5. 如含有脂类物质会导致吸收值明显升高。
6. 如因上述干扰因素存在,造成测定误差,请通过稀释、透析或其他处理方式,使干扰物质浓度降至BCA 检测最大兼容浓度以下。
7. 如果酶标仪没有 562 nm 检测波长,540 - 590 nm 之间的波长也可接受。
8. 为了您的安全和健康,请穿戴实验防i护服、手套、口罩等必要的防护装备。
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