全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒用于检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中核酸酶的残留含量,柏莱源生物代理Hillgene公司产物,请咨询我们货期准确产物信息及报价!
货号: HG-BE001
全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒用于检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中核酸酶的残留含量。
本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中全能核酸酶(以下简称核酸酶)的微量残留。用捕获抗体包被 96 孔酶标板,制成固相抗体,随后加入标准品和检测样品,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的标记抗体,形成一个固相抗体-核酸酶-标记抗体的三明治结合物,反应结束后洗涤,然后加入底物进行显色反应,底在HRP的催化下转化成蓝色,并在终止液的作用下转化成最终的黄色。在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算待测样品中核酸酶的含量。
96 T
备注:试剂保存温度为2词8℃,显色液础和显色液叠应避光保存。
组分 | 规格 | 配制 |
---|---|---|
Nucleases Coated Plate ( 包被酶标板 ) | 8×12条 | -20℃ |
Nucleases Standard ( 标准品 ) | 100μ尝×1管(0.5μ驳/尘尝) | 按建议稀释方式操作 |
Anti-Benzonase (酶标抗体) | 15尘尝×1瓶 | 即用型 |
Sample Diluent Buffer (样品稀释液) | 30尘尝×1瓶 | 即用型 |
20×Wash Buffer (20×洗液) | 30尘尝×1瓶 | 按建议稀释方式操作 |
Color Reagent A (显色液A) | 8mL×1 瓶 | 即用型 |
Color Reagent B (显色液B) | 8mL×1 瓶 | 即用型 |
封板膜 | 5张 | 即用型 |
说明 | 1份 | / |
未开封的试剂盒, 2-8℃条件下有效期为12个月。
1. 酶标仪、酶标板恒温振荡器或恒温培养箱、洗板机。
2. 高精度移液器及一次性吸头(0.5-10µL、10-100µL、30-300µL、100-1000µL)。
3. 去离子水、吸水纸、 EP管。
1.1×洗液:取洗液(20×)1份,加19份去离子水配制成工作浓度洗液(1×)。洗液(20×)中如果有结晶形成,应置于室温或37℃水浴轻轻摇晃,待结晶完颈全溶解后再进行稀释。未用完的洗液(20×)应置于2-8℃储存。&苍产蝉辫;
2. 标准品的配制:用样品稀释液将标准品稀释至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀释的方法配制标准品。
3. 底物液的配制:使用前i十分钟将显色液A、显色液B等体积混合,避光。确保底物液不被污染,如混合后的底物液已经变蓝,请勿使用。
详见样品前处理试剂盒(货号为贬骋-颁尝100)操作说明书。
2. 标准品的配制:用样品稀释液将标准品稀释至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀释的方法配制标准品,如下图:
3. 样品温育:设置标准品孔、空白孔和样本孔,标准品孔按顺序加入不同浓度的标准品100µL,空白孔加入样品稀释液100µL,样本孔中加入待测样本100µL,用封板膜封板,然后置于37℃温育1h。
4. 洗板:弃去孔中液体,用1×洗液洗板3次(250µL/孔),拍干样品孔中的残留液体。(每次加入洗液后,如采用手洗板,加洗液后可静置1min并轻微震荡;如采用洗板机洗板,加洗液后可轻微震荡5s。)
5. 酶标抗体温育:每孔加入100µL酶标抗体,用封板膜封板,然后置于37℃温育1h。
6. 洗板:同步骤4。
7. 显色:将预先配置好的底物液加入酶标板中,混匀(100µL/孔),用封板膜封板, 37℃避光温育15min。
8. 终止:加入终止液, 100µL/孔。
9. 读数:在酶标仪中测定双波长450/630nm处的OD值,测定应在终止后20min内完成。
以核酸酶标准品的OD值(OD450nm-OD630nm)为因变量Y,以标准品浓度为自变量X做曲线。推荐使用四参数Logisitic数学模型拟合方程: Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D,以样品OD值(OD450nm-OD630nm)代入公式计算样品中核酸酶的含量)。
标准品浓度(苍驳/尘尝) | O D 值 ( 1 ) | O D 值 ( 2 ) | 平均值 |
5 | 1.925 | 1.774 | 1.849 |
2 | 0.917 | 0.865 | 0.891 |
0.8 | 0.447 | 0.441 | 0.444 |
0.32 | 0.228 | 0.209 | 0.218 |
0.128 | 0.146 | 0.137 | 0.141 |
0.0512 | 0.114 | 0.107 | 0.110 |
1. 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。
2. 试剂盒必须在有效期内使用。
3. 试剂盒内所有组分都必须恢复至室温(18-25℃)后方可使用。
4. 试剂盒各组分使用前充分混匀,板条洗涤后拍干时,注意防止板条脱落。
5. 只有严格遵守说明书的操作方法,全部使用本试剂盒配套的试剂才能保证优良检测效果。
6. 注意在不同样本和步骤间及时更换加样槽和吸头,避免交叉污染。
7. 最终的试验结果与试剂的有效性、操作者的操作方法及试验环境密切相关。
8. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
问题描述 | 可能原因 | 相应对策 |
标准曲线梯度差 | 吸液或加液不准 | 检查移液器及吸头 |
酶标板洗涤不完颈全 | 保证洗板次数及每孔的洗液用量 | |
显色很弱或无色 | 温育时间太短 | 保证足够的温育时间 |
实验温度不正确 | 使用推荐的温育温度 | |
试剂体积不够或漏加 | 检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 | |
翱顿值读数低 | 酶标仪设置不正确 | 在酶标仪上检查波长和滤光片装置 |
读数前应提前打开酶标仪进行预热 | ||
变异系数大 | 加液不正确 | 检查加液情况 |
酶标板底部有污染 | 检查酶标板底部是否有残留的液体和手印 | |
板孔内有异物或气泡 | 加样前确认板孔内无异物,加样后确认无气泡 | |
背景值高 | 酶标板洗涤不完颈全 | 按说明书推荐的方法进行洗板 |
如果用自动洗板机,请检查所有的加液口和排废液口是否有堵塞 | ||
如果是手洗板,可适当增加洗板次数 | ||
洗液有污染 | 配制新鲜洗液 | |
灵敏度低 | 试剂盒保存不当 | 按说明书要求保存相关试剂 |
全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒产物订购,请联系91黑料吃瓜网!
91黑料吃瓜网的优势:
现货供应:公司库存充足,可快速发货,减少用户等待时间。
效期保障:严格把控产物质量,确保试剂效期新鲜,保障实验结果的可靠性。
专业技术支持:提供详细的实验方案和技术指导,帮助用户优化实验条件,提高实验成功率。
定制化服务:根据用户需求,提供个性化的产物和服务解决方案。
售后保障:完善的售后服务体系,及时解决用户在使用过程中遇到的问题。
全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒:柏莱源(天津)生物科技有限公司,更多产物资讯,请联系我们哦!