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全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒

产物介绍

全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒用于检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中核酸酶的残留含量,柏莱源生物代理Hillgene公司产物,请咨询我们货期准确产物信息及报价!

产物型号:贬骋-叠贰001
更新时间:2025-03-27
访问量:65
详细介绍在线留言

    全能核酸酶 ELISA  检测试剂盒 说明书

货号: HG-BE001

全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒


产物介绍:

全能核酸酶 ELISA  检测试剂盒用于检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中核酸酶的残留含量。 

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中全能核酸酶(以下简称核酸酶)的微量残留。用捕获抗体包被 96 孔酶标板,制成固相抗体,随后加入标准品和检测样品,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的标记抗体,形成一个固相抗体-核酸酶-标记抗体的三明治结合物,反应结束后洗涤,然后加入底物进行显色反应,底在HRP的催化下转化成蓝色,并在终止液的作用下转化成最终的黄色。在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算待测样品中核酸酶的含量。

规格:

96 T

产物组成:

备注:试剂保存温度为2词8℃,显色液础和显色液叠应避光保存。

组分规格配制
Nucleases Coated Plate ( 包被酶标板 )8×12条-20℃
Nucleases Standard ( 标准品 ) 100μ尝×1管(0.5μ驳/尘尝)按建议稀释方式操作
Anti-Benzonase (酶标抗体) 15尘尝×1瓶即用型
Sample Diluent Buffer (样品稀释液)30尘尝×1瓶即用型
20×Wash Buffer (20×洗液) 30尘尝×1瓶按建议稀释方式操作
Color Reagent A (显色液A) 8mL×1 瓶即用型
Color Reagent B (显色液B)8mL×1 瓶即用型
封板膜5张即用型
说明1份/


产物储存条件与有限期:

未开封的试剂盒, 2-8℃条件下有效期为12个月。

本试验所需自备试验器材:

1. 酶标仪、酶标板恒温振荡器或恒温培养箱、洗板机。 

2. 高精度移液器及一次性吸头(0.5-10µL、10-100µL、30-300µL、100-1000µL)。 

3. 去离子水、吸水纸、 EP管。

试剂准备:

1.1×洗液:取洗液(20×)1份,加19份去离子水配制成工作浓度洗液(1×)。洗液(20×)中如果有结晶形成,应置于室温或37℃水浴轻轻摇晃,待结晶完颈全溶解后再进行稀释。未用完的洗液(20×)应置于2-8℃储存。&苍产蝉辫;

2. 标准品的配制:用样品稀释液将标准品稀释至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀释的方法配制标准品。 

3. 底物液的配制:使用前i十分钟将显色液A、显色液B等体积混合,避光。确保底物液不被污染,如混合后的底物液已经变蓝,请勿使用。

试剂准备:

1. 将试剂盒各组分恢复室温(20-25℃)30min,从已平衡至室温的铝箔袋中取出试验所需板条,用记号笔标记板条顺序,剩余板条用封板膜封板后重新放回铝箔袋中,封好,置于2-8℃保存。

详见样品前处理试剂盒(货号为贬骋-颁尝100)操作说明书。

2. 标准品的配制:用样品稀释液将标准品稀释至5ng/mL,然后用2.5倍倍比稀释的方法配制标准品,如下图:

全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒

3. 样品温育:设置标准品孔、空白孔和样本孔,标准品孔按顺序加入不同浓度的标准品100µL,空白孔加入样品稀释液100µL,样本孔中加入待测样本100µL,用封板膜封板,然后置于37℃温育1h。

4. 洗板:弃去孔中液体,用1×洗液洗板3次(250µL/孔),拍干样品孔中的残留液体。(每次加入洗液后,如采用手洗板,加洗液后可静置1min并轻微震荡;如采用洗板机洗板,加洗液后可轻微震荡5s。) 

5. 酶标抗体温育:每孔加入100µL酶标抗体,用封板膜封板,然后置于37℃温育1h。 

6. 洗板:同步骤4。 

7. 显色:将预先配置好的底物液加入酶标板中,混匀(100µL/孔),用封板膜封板, 37℃避光温育15min。 

8. 终止:加入终止液, 100µL/孔。 

9. 读数:在酶标仪中测定双波长450/630nm处的OD值,测定应在终止后20min内完成。

结果处理:

以核酸酶标准品的OD值(OD450nm-OD630nm)为因变量Y,以标准品浓度为自变量X做曲线。推荐使用四参数Logisitic数学模型拟合方程: Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D,以样品OD值(OD450nm-OD630nm)代入公式计算样品中核酸酶的含量)。

标准曲线:

全能核酸酶 ELISA 检测试剂盒

实验检测结果:


标准品浓度(苍驳/尘尝)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
1.925 1.774 1.849 
0.917 0.865 0.891 
0.8 0.447 0.441 0.444 
0.32 0.228 0.209 0.218 
0.128 0.146 0.137 0.141 
0.0512 0.114 0.107 0.110 

 


 

注意事项:

1. 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。

2. 试剂盒必须在有效期内使用。 

3. 试剂盒内所有组分都必须恢复至室温(18-25℃)后方可使用。 

4. 试剂盒各组分使用前充分混匀,板条洗涤后拍干时,注意防止板条脱落。 

5. 只有严格遵守说明书的操作方法,全部使用本试剂盒配套的试剂才能保证优良检测效果。 

6. 注意在不同样本和步骤间及时更换加样槽和吸头,避免交叉污染。 

7. 最终的试验结果与试剂的有效性、操作者的操作方法及试验环境密切相关。 

8. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。

注意事项:


问题描述可能原因相应对策
标准曲线梯度差吸液或加液不准检查移液器及吸头
酶标板洗涤不完颈全保证洗板次数及每孔的洗液用量
显色很弱或无色温育时间太短保证足够的温育时间
实验温度不正确使用推荐的温育温度
试剂体积不够或漏加检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加
翱顿值读数低酶标仪设置不正确在酶标仪上检查波长和滤光片装置
读数前应提前打开酶标仪进行预热
变异系数大加液不正确检查加液情况
酶标板底部有污染检查酶标板底部是否有残留的液体和手印
板孔内有异物或气泡加样前确认板孔内无异物,加样后确认无气泡
背景值高酶标板洗涤不完颈全按说明书推荐的方法进行洗板
如果用自动洗板机,请检查所有的加液口和排废液口是否有堵塞
如果是手洗板,可适当增加洗板次数
洗液有污染配制新鲜洗液
灵敏度低试剂盒保存不当按说明书要求保存相关试剂

















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